高效液相色谱指纹图谱评价泻白散及其3种单味药内在质量（一） 其种止咳平喘之功效

泻白散出自宋代钱乙的高效《小儿药证直决》，收录于2018年中国中医药管理局下发的液相药内《古代经典名方目录（第一批）》。泻白散由桑白皮（炒黄）、色谱散及地骨皮、指纹质量炙甘草和粳米组成，图谱为煮散剂，泻白具有清泄肺热，其种止咳平喘之功效。单味其中，高效桑白皮为生长数十年的液相药内桑树除去外表粗皮的干燥根皮，其内在质量受生长年限影响较大。色谱散及目前地骨皮主要为野生资源，指纹质量其内在质量受生长环境影响较大。图谱甘草多为栽培品，泻白生长时间多为2～3年，其种其内在质量相对稳定。粳米的主要成分为淀粉和蛋白质，有无粳米对泻白散的特征图谱无影响。鉴于市售桑白皮、地骨皮药材质量受生长年限等因素影响较大，内在质量参差不齐，开展经典名方泻白散指纹图谱研究，以评估泻白散组方中来自全国不同地区市售炒桑白皮、地骨皮、炙甘草的内在质量具有重要意义。

黄梦婷等分析了桑白皮炮制前后指纹图谱和色度值的差异性；曹斯琼等标定了桑白皮14个共有峰；董丹华等对不同产地的15批次地骨皮药材进行研究，确定了4个特征峰；陈倩倩等对47批次地骨皮饮片进行质量分析，发现不同厂家的地骨皮质量差异较大；赵晓玲等测定并比较不同来源地骨皮药材（包括野生、栽培和市售）中地骨皮甲素、乙素和阿魏酸的含量，发现不同产地地骨皮各成分差异较大。自2018年《古代经典名方目录（第一批）》发布以来，对目录中经典名方的研究逐渐增多，但对泻白散高效液相色谱（HPLC）指纹图谱的研究相对较少，王彦帅等在泻白散的共有峰中指认了桑皮苷A、甘草苷、甘草酸铵3种物质；王彦等在泻白散物质基准的指纹图谱中，归属了10个特征峰，其中2个来自炒桑白皮、4个来自焙地骨皮、4个来自炙甘草。为了摸清市售炒桑白皮、地骨皮、炙甘草内在质量，保证泻白散临床用药质量及疗效，笔者建立HPLC指纹图谱方法并指认3种单味药的成分，对全国不同地区市售炒桑白皮、地骨皮、炙甘草进行内在质量评价，以期为泻白散经典名方的质量标准制定及临床用药提供参考。

1 实验部分

1.1 主要仪器与试剂

高效液相色谱仪：2690/5型，配备2996DAD检测器、全自动进样器、高效液相色谱工作站，美国Waters公司。电子分析天平：XS205DU型，感量为0.0001g，瑞士梅特勒-托利多公司。桑白皮、地骨皮、炙甘草样品：从全国各地收集桑白皮、地骨皮、炙甘草各13批样品，经山东省中医药研究院中药资源研究室鉴定均为《中国药典》正品。桑白皮按照2015年版《浙江省中药炮制规范》照清炒法炮制成炒桑白皮。13个泻白散组方及样品信息见表1。

桑辛素、甘草酸、异甘草素、桑皮苷A、地骨皮乙素、芹糖甘草苷、甘草素、异甘草苷、甘草苷、绿原酸对照品：含量（质量分数）均大于96%，批号分别为P09J7F8767、P31J9F66966、Z02M3L1、P12M9L61177、P22F10F81304、R03A9F67328、Z20J8X40265、R07D8F50056、Z10J8X39611、Y24J7K16726，上海源叶生物科技有限公司。甘草酸铵、东莨菪内酯、大黄素对照品：含量（质量分数）均大于96%，批号分别为110731-201720、110768-200504、110756-201913，中国食品药品检定研究院。乙腈、甲醇：均为色谱纯，美国BCL公司。磷酸：分析纯，天津市科密欧试剂公司。中药指纹图谱相似度评价系统软件：2004A版，国家药典委员会。实验用水：纯净水，屈臣氏集团（香港）有限公司。

1.2 色谱条件

色谱柱：ThermoSyncronisC18柱（250nm×4.6mm，5μm，美国赛默飞世尔科技有限公司），填充剂为十八烷基硅烷键合硅胶；检测器：二级管阵列检测器；柱温：30℃；流量：1mL/min；检测波长：254nm，进样体积：5μL；分析时间：120min；流动相：乙腈-0.1%甲酸水溶液，梯度洗脱程序见表2。

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